11507 – CALCIO MTB
07/20/202211520 – GAMMAGLOBULINA TRANSFERASA (g-GT)
07/20/2022
11511 – BILIRRUBINA DIRECTA
11511 – BILIRRUBINA DIRECTA 4X50 ml
SULFANÍLICO DIAZOADO
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FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La bilirrubina directa presente en la muestra reacciona con el ácido sulfanílico diazoado, originando un complejo coloreado que puede determinarse espectrofotométricamente. La cetrimida solubiliza la
bilirrubina indirecta permitiendo su reacción junto con la fracción directa 1,2.
Los términos “directa” y “total” se refieren a las características de reacción en presencia o ausencia de solubilizantes (aceleradores). La bilirrubina “directa” e “ indirecta” equivale sólo de forma aproximada a las fracciones conjugada y no conjugada.
CONTENIDO
| Reactivo AT | Reactivo AD | Reactivo BT | Reactivo BD | |
|---|---|---|---|---|
| COD 11515 | 2 x 40 mL | 2 x 40 mL | 2 x 10 mL | 2 x 10 mL |
| COD 11555 | 400 mL | 400 mL | 1 x 100 mL | 1 x 100 mL |
| COD 11510 | 4 x 40 mL | — | 4 x 10 mL | — |
| COD 11544 | 2 x 400 mL | — | 2 x 100 mL | — |
| COD 11511 | — | 4 x 40 mL | — | 4 x 10 mL |
| COD 11545 | — | 2 x 400 mL | — | 2 x 100 mL |
COMPOSICIÓN
BILIRRUBINA (TOTAL)
AT. Reactivo. Acido sulfanílico 29 mmol/L, ácido clorhídrico 0,2 mol/L, cetrimida 50 mmol/L.
BT. Reactivo. Nitrito sódico 11,6 mmol/L.
BILIRRUBINA (DIRECTA)
AD. Reactivo. Acido sulfanílico 35 mmol/L, ácido clorhídrico 0,24 mol/L.
BD. Reactivo. Nitrito sódico 3,5 mmol/L.
CONSERVACIÓN
Conservar a 15-30oC.
Los Reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro:
- Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0,05 a 540 nm (cubeta de 1 cm).
REACTIVOS AUXILIARES
- S. Patrón de Bilirrubina (cod 11513). Reconstituir con 5,0 mL de agua destilada (Nota 1). La concentración viene indicada en la etiqueta del vial. El valor de concentración es trazable al Material de Referencia Certificado 916a (National Institute of Standards and Technology, USA). Proteger el Patrón reconstituído de la luz. Estable 4 horas a 15-30oC o bien durante 2 meses a –18oC congelado en alícuotas.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Reactivo de Trabajo: Vaciar el contenido de un vial de Reactivo BT en un frasco de Reactivo AT para la determinación de bilirrubina total, o el contenido de un vial de Reactivo BD en un frasco de Reactivo AD para la determinación de bilirrubina directa (Nota 2).
Agitar suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 1 mL de Reactivo BT + 4 mL de Reactivo AT o 1 mL de Reactivo BD + 4 mL de Reactivo AD. Estable 20 días a 2-8oC.
EQUIPO ADICIONAL
- Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37oC para lecturas a 540 ± 20 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz (si se utiliza el factor en los cálculos).
CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
La bilirrubina es un producto de desecho derivado del grupo hemo de la hemoglobina de los eritrocitos dañados o senescentes, que son destruidos en las células retículoendoteliales. Una vez producida, la bilirrubina se transporta al hígado en asociación con la albúmina. La bilirrubina en el hepatocito se conjuga con el ácido glucorónico y se excreta en la bilis. Existen una serie de enfermedades heredadas o adquiridas que afectan a la producción, captación, metabolismo y excreción de bilirrubina, resultando en una hiperbilirrubinemia 3,5.
Se observa hiperbilirrubinemia no conjugada en recién nacidos (icterícia fisiológica), en un aumento de la destrucción de eritrocitos (anemia hemolítica, hematoma extenso), en eritropoyesis defectuosa así como en algunas enfermedades genéticas poco frecuentes (síndrome de Gilbert, síndrome de Crigler-Najjar).
La hiperbilirrubinemia conjudada se asocia a una disminución en la excreción de bilis debida a enfermedades hepáticas (hepatitis o cirrosis) o bien a una colestasis intra o extrahepática.
La icterícia es una manifestación clínica de la hiperbilirrubinemia, que consiste en una deposición de los pigmentos biliares en la piel, originando coloración amarillenta de la piel y mucosas.
El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
NOTAS
1. Para la determinación de bilirrubina en recién nacidos, reconstituir el Patrón con 1,0 mL de agua destilada. La concentración en este caso será la indicada en la etiqueta multiplicada por 5. Reducir el volumen de muestra (agua, patrón, suero) a 50 μL y utilizar el Patrón concentrado. Se duplica así la linealidad del método (hasta 30 mg/dL= 514 μmol/L).
2. Es conveniente lavar el vial de Reactivo B con una pequeña cantidad de la mezcla preparada, con el fin de arrastrar los restos que mojan las paredes del frasco.
3. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayoría de analizadores automáticos. Solicite información a su distribuidor.
4. La calibración con el patrón acuoso suministrado puede causar sesgos, especialmente en algunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrón de base sérica (Calibrador Bioquímica, cod. 18011 y 18044).
BIBLIOGRAFÍA
1. Pearlman FC and Lee RTY. Detection and measurement of total bilirubin in serum, with use of surfactants as solubilizing agents. Clin Chem 1974; 20: 447-453.
2. Zoppi F, Peracino A, Fenili D, Marcovina S and Ramella C. Metodo per la determinazione della bilirubina totale e coniugata. Uso di un tensioattivo cationico come agente solubilizzante. Giorn It Chim Cl 1976; 1:343-359.
3. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd edition. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., 1994.
4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997.
5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997.
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