11548 – FOSFATASA ACIDA

NAFTIL FOSFATO/PENTANODIOL

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FUNDAMENTO DEL MÉTODO

La fosfatasa ácida (FAC) cataliza en medio ácido la hidrólisis del α-naftil fosfato. El α-naftol producido reacciona con una sal de diazonio (Fast Red TR) formando un cromógeno. La actividad catalítica se determina a partir de la velocidad de formación de dicho cromógeno medido a 405 nm1. El pentanodiol acelera la reacción al actuar como aceptor del fosfato. El tartrato se utiliza como inhibidor específico de la denominada fracción prostática 1,2.

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN

• AT. Reactivo. 1 x 45 mL. Citrato sódico 110 mmol/L, 1,5-pentanodiol 220 mmol/L, pH 5,2. AI.
• Reactivo. 1 x 22,5 mL. Citrato sódico 110 mmol/L, 1,5-pentanodiol 220 mmol/L, tartrato disódico 110 mmol/L, pH 5,2.
• B1. Reactivo. 4 tapones para 10 mL. α-Naftil-fosfato 12,5 mmol/L, una vez disuelto.
• B2. Reactivo. 4 para 10 mL. Fast Red TR 1,25 mmol/L, una vez disuelto.
• C. Reactivo. 1 x 5 mL. Acido acético 0,6 mol/L.

CONSERVACIÓN

Conservar a 2-8oC.

Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.

Indicaciones de deterioro:

• Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0,450 a 405 nm (cubeta de 1 cm).

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS

Reactivo de Trabajo: Colocar el tapón de Reactivo B1 en el frasco de Reactivo B2 y presionar el boton rojo para que el polvo caiga en el frasco. (Nota 1). Añadir 10 mL de Reactivo AT (FAC total) o de Reactivo AI (FAC no prostática). Agitar hasta disolución completa. Estable 10 días a 2-8oC

EQUIPO ADICIONAL

• Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 30 ó 37oC para lecturas a 405 nm
• Cubetas de 1 cm de paso de luz.

CARACTERISTICAS DIAGNÓSTICAS

La fosfatasa ácida cataliza la hidrólisis de monoésteres de fosfato orgánicos a pH ácido. Las principales fuentes tisulares de la FAC de la sangre son la próstata, el bazo, hígado, riñón y otros elementos celulares.

La determinación de la concentración de FAC en suero se orienta casi siempre a la enzima prostática con la finalidad de detectar o controlar alteraciones prostáticas (hipertrofia, prostatitis, carcinoma) 4,5.

También se encuentran concentraciones séricas elevadas de FAC en algunas enfermedades hematológicas (trombocitopenia idiopática, leucemia mielocítica) y óseas (enfermedad de Paget, carcinoma óseo) así como en cáncer de mama, algunas enfermedades hepáticas (hepatitis, ictericia obstructiva), lesión renal aguda, enfermedad de Niemann-Pick y enfermedad de Gaucher 4,5.

El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.

NOTAS

1. Una pequeña parte del polvo puede quedar atrapada entre el obturador y el vial sin que ello afecte las características del reactivo.

2. Este reactivo puede utilizarse en la mayoría de analizadores automáticos. Solicite información a su distribuidor.

BIBLIOGRAFÍA

1. Hillman GV. Fortlaufende photometrische messung der sauren prostataphosphatase activität. Z Klin Chem Klin Biochem 1971; 9: 273-274.

2. Maire I. Comité scientifique. Commission enzymologie. Recommendations pour la mesure de la concentration catalytique des phosphatases acides dans le sérum humain à 30 oC. ISB 1991; 17: 327-340.

3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997.

4. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997.

5. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd edition. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., 1994.

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