12557 – A25 COLESTEROL HDL
03/28/202312570 – A25 CALCIO ARSENAZO
03/29/202312566 – A25 CREATINA QUINASA MB
12566 – CREATINA QUINASA-MB (CK-MB)
Inmunoinhibición
Reactivos dedicados para el Analizador automatico Random Access A15 y Analizador Automatico Random Access A25
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USO PREVISTO
Reactivo para la medición de la concentración de creatina quinasa-MB (CK-MB) en suero o plasma humano. Los valores obtenidos son útiles como ayuda en el diagnóstico y control de la evolución del infarto agudo de miocardio.
Estos reactivos deben ser utilizados en los analizadores A25 y A15 de BioSystems o en otro analizador de prestaciones similares.
La creatina quinasa esta compuesta de 2 cadenas polipeptídicas, denominadas B (de cerebro) y M (de músculo), que dan origen a los tres isoenzimas diméricos: MM (CK-1), MB (CK-2) y BB (CK-3).
Los porcentajes de la actividad de CK-MB sérica respecto a la actividad CK total suele ser inferior al 6%. Sin embargo, estos valores aumentan al 10 a 30% después de un infarto de miocardio dependiendo de la extensión de tejido miocárdico afectado y de la localización del infarto. No obstante, pueden encontrarse índices bajos de CK-MB sérica tras un infarto de un miocardio previamente sano. Por consiguiente, el diagnóstico de infarto de miocardio debe basarse en la historia clínica y otros datos, junto con la magnitud de la elevación de CK-MB y su perfil en el tiempo.
El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
Un anticuerpo específico inhibe las dos subunidades M de la CK-MM (CK-3) y la única subunidad M de la CK-MB (CK-2), lo que permite la medición de la subunidad B de la de la CK-MB (asumiendo la ausencia de CK-BB o CK-1)3,4. La concentración catalítica de CK-B, que corresponde a la mitad de la actividad CK-MB, se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa (HK) y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH), a partir de la velocidad de formación del NADPH, medido a 340 nm5.
CK-B
Fosfato de creatina + ADP —————-> Creatina + ATP
HK
ATP + Glucosa ——————–> ADP + Glucosa – 6 – fosfato
G6P-DH
Glucosa – 6 – fosfato + NADP+ ————————-> Gluconato – 6 – fosfato + NADPH + H+
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
- A. Reactivo: 3 x 12 mL. Anti-humano-CK-M capaz de inhibir 2000 U/L de CK-M, Imidazol 125 mmol/L,
EDTA 2 mmol/L, acetato de magnesio 12,5 mmol/L, D-glucosa 25 mmol/L, N-acetilcisteína 25 mmol/L, hexoquinasa 6800 U/L, NADP 2,4 mmol/L, pH 6,1.
- B. Reactivo: 1 x 10 mL. Fosfato de creatina 250 mmol/L, ADP 15,2 mmol/L, AMP 25 mmol/L, P1, P5-di(adenosina-5′-) pentafosfato 103 umol/L, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa 8800 U/L.
PELIGRO: H360: Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P201: Pedir instrucciones especiales antes del uso. P202: No manipular la sustancia antes de haber leído y comprendido todas las instrucciones de seguridad. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P308+P313: En caso de exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. P405: Guardar bajo llave.
Para más advertencias y precauciones, ver la ficha de datos de seguridad del producto (SDS).
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8oC.
Los componentes son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del kit, siempre que
se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Estabilidad a bordo: Los reactivos abiertos y conservados en el compartimento refrigerado del analizador son estables 15 días.
Indicaciones de deterioro: Absorbancia del blanco superior al límite indicado en “Parámetros de la prueba”.
MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS (NO SUMINISTRADOS)
- S. Patrón de Creatina Quinasa-MB (CK-MB) (BioSystems cod. 11824). CK-MB humana. La concentración de CK-MB viene indicada en la etiqueta del vial. El valor de concentración es trazable al material de referencia ERM-AD455/IFCC (IRMM).
Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el antígeno HBs y para los anticuerpos anti-HCV y anti-HIV. Sin embargo, deben tratarse con precaución como potencialmente infecciosos.
Reconstituir el liofilizado con 1 mL de agua destilada. Estable 7 días a 2-8oC o 2 meses a -20oC.
Congelar sólo una vez.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Reactivo de Trabajo: Añadir 3,0 mL del RB a un frasco del Reactivo A. Mezclar suavemente. Si se
desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B.
Estable 15 días a 2-8oC. El reactivo de trabajo se ha de proteger de la luz.
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