IHIBG-425 PRUEBA DE HIV CERTUM

USO PREVISTO

La Prueba Rápida en Cassette de VIH 1.2 y p24 en Combo (Sangre Entera/Suero/Plasma) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa del anticuerpo VIH tipo 1, del anticuerpo VIH tipo 2 y del antígeno p24 del VIH-1 en muestras de sangre entera, suero o plasma como auxiliar en el diagnóstico de la infección por VIH.

RESUMEN

VIH 1.2

El VIH (Virus de Inmunodeficiencia Humana) es el agente etiológico del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). El virión está rodeado por una envoltura de lípidos, donde se encuentran varias glicoproteínas derivadas de la membrana de una célula huésped. Cada virus contiene dos copias de ARNs genómicos de sentido positivo. EL VIH-1 ha sido aislado de pacientes con SIDA o complicaciones relacionadas con SIDA, así como de personas saludables con un alto riesgo de desarrollar SIDA. 1 VIH 2 ha sido aislado de pacientes de África Oeste con SIDA y de individuos seropositivos asintomáticos. 2 Tanto el VIH-1, VIH-2 provocan respuestas inmunes. 3 La detección de anticuerpos VIH en suero, plasma o sangre entera es la manera más eficiente y común para determinar si un individuo ha sido expuesto al VIH, y para buscar VIH en sangre y 4en hemoderivados. A pesar de las diferencias en los caracteres biológicos, actividades serológicas y secuencias del genoma, el VIH-1 y VIH-2 muestran una reactividad cruzada antigénica fuerte. 5,6 La mayoría de los sueros VIH-2 positivos pueden identificarse utilizando pruebas serológicas basadas en el VIH-1.

La Prueba Rápida en Cassette de VIH 1.2 (Sangre Total/Suero/Plasma) es una prueba rápida para detectar cualitativamente la presencia de anticuerpos de VIH tipo 1 y 2 en sangre total, suero o plasma.

VIH p24

El antígeno VIH p24 es un pequeño trozo de proteína que se encuentra en la cápsula del virus VIH. Cuando una persona se infecta con VIH, estas partículas de proteína pueden encontrarse flotando en la sangre. La Prueba Rápida de Antígeno VIH p24 es la prueba que detecta esas partículas de proteína. Esta prueba fue primero desarrollada como una prueba de tamizaje de VIH pero rápidamente dejó de usarse debido al 7 desarrollo de pruebas NAT más avanzadas. El periodo ventana para la prueba de p24 es también muy corto. Esta prueba es sólo fiel por entre 3 y 6 semanas después de 8 haber estado expuesto. Así que es una prueba con aplicaciones muy limitadas a menos que esté combinada con una prueba de anticuerpos de VIH. La presencia del antígeno p24 en la sangre indica una infección reciente de VIH. 9

La Prueba Rápida de Antígeno VIH p24 (Sangre Entera/Suero/Plasma) es una prueba rápida para detectar cualitativamente la presencia del antígeno p24 para VIH 1 en muestras de sangre entera, suero o plasma. La prueba utiliza anticuerpos VIH p24 conjugados al látex, para detectar selectivamente el antígeno p24 de VIH tipo 1 en sangre total, suero o plasma.

PRINCIPIO

VIH 1.2

La Prueba Rápida de VIH 1.2 (Sangre Entera/Suero/Plasma) es un inmunoensayo cualitativo basado en una membrana para la detección de anticuerpos VIH 1.2 en sangre entera, suero y plasma. La membrana se pre-recubre con antígenos VIH recombinantes.

Durante la prueba las muestras de sangre total, suero o plasma reaccionan con los antígenos recubiertos de partículas de VIH en el cassette de prueba. La mezcla migra hacia arriba en la membrana cromatográficamente por acción capilar y reacciona con los antígenos VIH recombinantes en la membrana en la región de la línea de prueba. Si la muestra contiene anticuerpos de VIH 1 y/o VIH 2, una línea coloreada aparecerá en la región de la línea de prueba, indicando un resultado positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos VIH 1 y/o VIH 2, no aparecerá una línea coloreada en la región de la línea de prueba, indicando un resultado negativo. Para servir como control de procedimiento, una línea coloreada siempre aparecerá en la región de la línea control, indicando que un volumen apropiado de la muestra ha sido adicionado y que ha ocurrido absorción en la membrana.

VIH p24

La Prueba Rápida de Antígeno p24 (Sangre Entera/Suero/Plasma) es un inmunoensayo cualitativo basado en una membrana para la detección del antígeno p24 del VIH tipo 1 en sangre entera, suero o plasma. La membrana se pre-recubre con anticuerpo de ratón anti-VIH p24. Durante la prueba, la muestra de sangre entera, suero o plasma reacciona con las partículas cubiertas con el anticuerpo VIH p24 en el cassette de prueba.

Después, la mezcla se desplaza hacia arriba en la membrana romatográficamente por capilaridad y reacciona con el anticuerpo VIH p24 en la membrana en la región de línea de prueba. Si la muestra contiene antígeno p24 para VIH tipo 1, aparecerá una línea de color en la región de la línea de prueba, lo cual indica un resultado positivo. Si la muestra no contiene antígeno p24 para VIH tipo 1, no aparecerá ninguna línea de color en la región de la línea de prueba, lo cual indica un resultado negativo. Para servir como control de procedimiento, una línea de color siempre aparecerá en la región de la línea de control, lo cual indica que se agregó el volumen correcto de muestra y que se produjo la capilaridad en la membrana.

REACTIVOS

La prueba contiene antígeno VIH tipo 1 y tipo 2, partículas recubiertas de anticuerpo VIH p24 y antígeno recombinante VIH tipo 1, antígeno recombinante tipo 2, y anticuerpo p24 recubierto en la membrana.

PRECAUCIONES

• Para uso profesional en diagnóstico in vitro solamente. No utilizar después de la fecha de vencimiento.
• No comer, beber o fumar en el área donde las muestras o cassettes de prueba son manipulados.
• No utilizar la prueba si el sobre está dañado.
• Manipular todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. Tome las precauciones establecidas contra riesgos microbiológicos durante todos los procesos y siga los procedimientos normativos para el desecho adecuado de muestras.
• Vestir ropa protectora como batas de laboratorio, guantes desechables y protección ocular cuando las muestras son probadas.
• La prueba usada debe ser desechada de acuerdo a las regulaciones locales.
• La humedad y la temperatura pueden afectar adversamente los resultados.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Este kit puede almacenarse a temperatura ambiente o refrigerarse (2-30°C). La prueba es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en el sobre sellado. La prueba debe permanecer en el sobre sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar más allá de la fecha de vencimiento

RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS

• La Prueba Rápida en Cassette de VIH 1.2 y p24 en Combo (Sangre Entera/Suero/Plasma) puede ser realizada utilizando muestras de sangre entera (obtenida por venopunción o punción dactilar), suero o plasma.
• Para recolectar muestras de sangre entera por punción dactilar:
  • Lave la mano del paciente con agua tibia y jabón o limpie con una torunda alcoholada. Deje secar.
  • Masajee la mano sin tocar el sitio de la punción frotando la mano hacia abajo y hacia la yema del dedo medio o del dedo anular.
• Punce la piel con una lanceta estéril. Limpie el primer signo de sangre.
• Frote suavemente la mano desde la muñeca hacia la palma, y hasta el dedo para formar una gota redondeada sobre el sitio de la punción.
• Añada la muestra por punción dactilar de sangre entera a la prueba utilizando un tubo capilar:
  • Toque con un extremo del tubo capilar la sangre hasta llenar aproximadamente 50 μL. Evite burbujas de aire.
  • Coloque el bulbo en el extremo superior del tubo capilar, después presione el bulbo para dispensar la sangre entera al área de muestra del cassette de prueba.
• Separe el suero o plasma de la sangre lo más pronto posible para evitar hemólisis. Utilice solamente muestras limpias no hemolizadas.
• Las pruebas deben realizarse inmediatamente después de que las muestras se hayan recolectado. No deje las muestras a temperatura ambiente por periodos prolongados. Las muestras de suero o plasma pueden almacenarse entre 2-8°C por hasta 3 días. Para almacenamiento a largo plazo, las muestras deben mantenerse debajo de -20°C. La sangre entera recolectada por venopunción debe ser almacenada entre 2-8°C si la prueba se realizará dentro de los 2 días siguientes después de la recolección. No congele muestras de sangre entera. La sangre entera recolectada por punción dactilar debe ser probada inmediatamente.
• Permita que las muestras se encuentren a temperatura ambiente antes de realizar las pruebas. Las muestras congeladas deben descongelarse por completo y estar bien mezcladas antes de la prueba. Las muestras no deben congelarse y descongelarse repetidamente.
• Si las muestras serán enviadas, deben estar empaquetadas de acuerdo a las normas locales que cumplan con el transporte de agentes etiológicos.
• EDTA K2, Heparina de sodio, citrato de sodio y Oxalato de potasio pueden ser utilizados como coagulantes en el tubo para recolección de la muestra de sangre.

MATERIALES

Materiales incluidos

• Cassettes de Prueba
• Goteros
• Buffer
• Inserto de Paquete

Materiales requeridos, pero no incluidos

• Recipientes para recolección de muestras
• Temporizador
• Centrífuga
• Tubos capilares heparinizados y bulbo dispensador (solamente para sangre entera por punción dactilar)
• Lancetas (solamente para sangre entera por punción dactilar)

INSTRUCCIONES DE USO

Deje que la prueba, la muestra, el buffer y/o los controles alcancen una temperatura ambiente (15-30°C) antes de realizar las pruebas.

1. 1. Permita que el sobre esté a temperatura ambiente antes de abrirlo. Retire el cassette de prueba del sobre sellado y úselo lo antes posible.
   2. Coloque el cassette en una superficie limpia y plana.

Para muestras de Suero o Plasma: Sostenga el gotero verticalmente y transfiera 1 gota de suero o plasma (aproximadamente 25 μL) al área de muestra, después agregue 1 gota de buffer (aproximadamente 40 μL) e inicie el temporizador. Ver ilustración a continuación.

Para muestras de Sangre Entera por Venopunción: Sostenga el gotero verticalmente y transfiera 2 gotas de sangre entera (aproximadamente 50 μL) al área de muestra, después agregue 2 gotas de buffer (aproximadamente 80 μL) e inicie el temporizador.

Ver ilustración a continuación.

Para muestras de Sangre Entera por Punción Dactilar:

Usando un tubo capilar: Llene el tubo capilar y transfiera aproximadamente 50 uL de muestra de sangre entera por punción dactilar al área de muestra del cassette de prueba, después agregue 2 gotas de buffer (aproximadamente 80 μL) e inicie el temporizador. Ver ilustración a continuación

1. Espere a que aparezcan la(s) línea(s) de color. Lea los resultados a los 10 minutos.

No interprete los resultados después de 20 minutos.

Nota: Se sugiere no utilizar el buffer, después de 30 días de abrir el vial.